ウイルスフリーのヒトiPS細胞誘導 STEMcircles
製品概要
STEMcircles-LGNSOミニサークルDNAは、体細胞のリプログラミング能を有する4つの因子
(Lin28, Nanog, Sox2, Oct4)、及びGFPレポーター遺伝子を含みます。
STEMcirclesベクターは、
- 遺伝子発現に必要な最小限のDNAシークエンスが含まれています
- 通常使用されるプラスミドDNAより小さく、バクテリアDNAを含みません
- 細胞が外来のDNAに対して自然に作用するサイレンシングのメカニズムを
避けることが出来ます
その結果、安定した遺伝子発現が行える為、通常のプラスミドDNAよりも優れたリプログラミングが
可能です。ウイルスを使用せず、ゲノムにインテグレートされない方法は、iPS細胞作製に理想的な
方法です。
STEMcircles-LGNSO Vector
4つのリプログラミング因子及びGFPの発現はCMVプロモーターで誘導される(Jia et al., 2010)
特長
- ウイルスを使用せず、ゲノムにインテグレートされません。
- ひとつのベクターにすべてのリプログラミング因子を含みます。
- トランスフェクション効率をモニターする為にGFPレポーター遺伝子を使用しております。
- 抗生剤によるセレクションの必要がありません。
利点
- 簡単で安全なリプログラミングの方法
- 典型的なプラスミドより高いリプログラミング効率
必要な器具・試薬
下記Nature Methods1に紹介されているトランスフェクションの方法の1つに、Amaxa
nucleofector system(機械,プログラム,試薬)を使用した記載がございますので、ご参考
下さい。またここで紹介されている以外のトラスフェクションの方法もご利用頂けますので、
ご検討頂ければと思います。またセルソーターを使用することでGFP陽性細胞の分離及び、
最終的なiPSCクローンやトランスフェクトされた細胞の頻度を算出することが可能です。
参考文献
- Fangjun Jia et al.A nonviral minicircle vector for deriving human iPS cellsNat Meth advance online publication (3) 197-199 (February 7, 2010)
- Elayne Chan et al.Live cell imaging distinguishes bona fide human iPS cells from partially reprogrammed cellsNat Biotech 27 (11) 1033-1037 (November 2009)
- Zhi-Ying Chen et al.Improved production and purification of minicircle DNA vector free of plasmid bacterial sequences and capable of persistent transgene expression in vivo.Hum Gene Ther 16 (1) 126-131 (January 2005)
- Zhi-Ying Chen et al.Minicircle DNA Vectors Devoid of Bacterial DNA Result in Persistent and High-Level Transgene Expression in VivoMol Ther 8 (3) 495-500 (September 2003)
製品資料
製品リスト
| コードNo. |
品名
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梱包単位
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ST-05820
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STEMcircles-LGNSO
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100 μg
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ES/iPS細胞関連製品